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| 这个载体能治病 | |||||||||
| 【2012-4-17】 | |||||||||
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腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒，腺病毒载体是继逆转录病毒载体之后在基因治疗中广为应用的一种基因转移载体，可感染种类相当广泛的有丝分裂后细胞，甚至包括来自高度分化的组织中的细胞，例如骨骼肌细胞、肺细胞、脑细胞和心肌细胞。该病毒有以下优点：①对人类安全，无致畸、致病及致癌性；②对分裂细胞及癌细胞株的转染效率非常高；③腺病毒感染细胞时DNA不整合到宿主细胞染色体中；④腺病毒容易制备、纯化和浓缩，可达到较高滴度；⑤腺病毒载体插入外原基因的容量较大，所以目前国外多用复制缺陷的腺病毒为载体介导p53基因转移。p53基因治疗的研究虽然取得了一定的成绩，也存在不少问题。 最突出的问题为抗体的产生,病毒载体均可引起抗体产生。腺病毒能引发强烈的免疫反应，在第一次感染后两wk内恒河猴血浆中的抗腺病毒体滴度升高。由于抗体的产生，腺病毒为载体的基因导入难以反复应用。近年来，人们对这种载体作了大量改造工作，细胞毒性和免疫原性都有所减弱。由于比格犬的长期多次开胸心肌注射有困难，故本实验给药方法为：心肌注射和臀部肌肉注射相结合的给药方法。一方面考虑到长毒的用药途径与临床用药的一致性；另一方面，考虑到犬心肌注射开胸腔造成的创伤太大，若反复多次开胸给药，创伤所引起的反应可能会干扰毒性反应的观察指标，故采用首次心肌注射，其余肌肉注射给药。 有关专家对此进行的研究，本研究结果显示：①手术对照、正常对照组，细胞出现明显CPE，GFP为阳性，而接受多次AdHGF注射的动物，细胞不出现CPE，GFP阴性，说明多次注射AdHGF后出现抗腺病毒抗体。②停药七周后出现不完全中和反应，抗体水平开始下降。停药十二周抗体逐渐消失，分别出现明显CPE及荧光，两项检测指标互补，实验结果可信。③比格犬血清对293细胞毒性较大，有时影响观察，必须事先灭活。局部注射AdHGF后HGF的表达仅在局部，而且HGF蛋白的半衰期很短，这个我们要多加的注意。 （6）（32） |
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