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这个研究需要的试剂 | |||||||||
【2012/4/23】 | |||||||||
为了研究丙型肝炎病毒相关事项,目的:研究慢性HCV(丙型肝炎病毒)感染患者外周血单个核细胞(PBMC)体外Th1类细胞因子的分泌,进一步了解HCV感染慢性化和肝损伤机制。方法:体外培养慢性HCV感染患者PBMC72h后,ELISA检测培养上清Th1类细胞因子(IL2,IFNγ,TNFα),荧光定量PCR检测患者血清HCVRNA含量,RTPCR检测HCVRNA亚型。结果:与正常人相比,IFNγ在HCVRNA阴性患者中明显增高,而在RNA阳性患者中无明显升高。TNFα则不论RNA滴度的高低均较正常人显著增高。RNA阳性患者ALT(丙氨酸 转移酶),AST(门冬氨酸 转移酶)水平明显高于阴性患者。不同HCV基因型感染的患者IFNγ,TNFα的分泌无显著差异。结论:IFNγ在清除病毒中起重要作用,TNFα是引起肝脏损伤的重要因素之一。 HCV(丙型肝炎病毒)感染后易于慢性化,但其慢性化机制仍不十分清楚。有研究[1-2]表明,天然免疫、体液免疫以及细胞免疫均对病毒的清除有重要作用,而细胞免疫尤为重要。Th1类细胞因子是参与细胞免疫的重要物质,在细胞清除细胞内病原体的免疫应答过程中起关键作用,但同时也是诱发肝脏损伤的重要机制。我们比较了HCV感染后体内不同病毒滴度及不同的基因型患者的外周血单个核细胞(PBMC)体外分泌Th1类细胞因子及肝脏的炎症情况,以进一步了解HCV感染慢性化和肝损伤机制。 对象收集我院门诊或住院的慢性HCV感染患者四十多例,平均年龄四十多岁,所有病例均符合两千年全国第十次病毒性肝炎及肝病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案慢性HCV感染诊断标准。对照十例为健康献血员。淋巴细胞提取液、Trizol、细胞因子ELISA检测试剂盒;AMV(逆转录酶),RNA酶抑制剂、dNTP,Taq酶;RPMI1640母液;GeneAMP5700型HCVRNA定量检测仪;AU600肝功能检测仪;这些试剂都来自同一个地方。 (6)(32) |
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