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对于白癜风患者红细胞免疫功能检测 | |||||||||
【2009/7/18】 | |||||||||
一些研究者用PCR方法,在斑秃患者皮损的石蜡包埋组织中回顾性地检测出巨细胞病毒(CMV)DNA。我们采用PCR方法检测了36例斑秃患者皮损组织中的巨细胞病毒DNA,旨在探讨巨细胞病毒在斑秃发病中的意义。 一、临床资料 选择1997年1月至1999年1月2年中就诊于本院皮肤科确诊为斑秃的患者36例,其中男21例,女15例,年龄9~51岁,平均36.5岁。斑秃28例,全秃5例,普秃3例。病期(局部皮损出现的时间,不包括反复发作的时间)最短1个月,最长15年,平均2.3年,其中8例全秃和普秃患者病期2.8~15年。对照组为正常头皮组织(局部手术切除的剩余组织)23例,男18例,女5例,年龄10~61岁,平均39.1岁。 二、实验方法 从石蜡包埋的组织标本中切取5~10μm厚的薄片1~2片,放入Eppendorf管内,二 脱蜡,乙醇去掉二 ,然后去除乙醇,反复3次脱蜡,常规蛋白酶K消化后,加入CMVDNA裂解液50μL,将Eppendorf管(包括组织)置沸水预处理10min,然后10000r/min离心5min,用CMV-PCR试剂盒(购于华美公司)扩增3μL上清液(详见说明书)。取扩增后的液体10μL进行琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外线分析仪观察,若434bp处出现DNA扩增带为阳性,否则为阴性。 三、结果 斑秃患者组的CMVDNA阳性率为55.6%(20/36),其中全秃和普秃均为阴性,对照组的阳性率为17.4%(4/23),χ2=8.47,P<0.01;病例组中病期在1年以内有23例,19例阳性,阳性率82.6%;1~3年有8例,1例阳性;3~15年5例,均阴性。 四、讨论 我们的研究表明在斑秃皮损中巨细胞病毒DNA检测的阳性率为55.6%,而对照组仅为17.4%。发根部是巨细胞病毒潜伏的较常见部位,所以在对照组也检测出4例阳性。另外我们还发现病期在1年以内的患者阳性率为82.6%,1~15年的阳性率为12.5%,病期短、进行期斑秃患者其阳性率明显增高,这可能与斑秃的早期病理改变有一定的相关性,全秃和普秃(病期为2.8~15年)均阴性也可能与此有关,因病期长的病例数较少,还有待于进一步观察研究。 (zl2) |
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